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7个白菜品种中4种同工酶的比较研究

 

徐丽珊

(浙江师范大学环境与生命科学学院,金华 321004)

 

白菜不同品种的种子外观相近,不宜区分,但生理状况各不相同。如搞混或搞错,不仅产量下降,甚至毁种而造成公司和菜农利益受损。电泳鉴定有准确、可靠、快速等优点。

1 材料与方法

供试材料及其编序为上海矮抗青A、长梗白菜B、上海青C、605D、四月蔓E、三月蔓F、油冬菜G。均由金华种子公司提供。

供试试剂中丙烯酰胺(ACR)、甲叉双丙烯酰胺(BIS)、四甲基已二胺(TEMED)为进口分装。其他试剂均为国产分析纯。

7个白菜种子分别在20℃恒温箱中培养3天(芽长1.5~2cm)。取芽、称重,用一倍量PH=7的磷酸缓冲液匀浆,离心,取上清液即为样品液。

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法即样品液+40%蔗糖液+1滴0.1%溴酚蓝液为加样液,加样量为50ul/孔。进行SOD、MDH、POD、EST同工酶染色。

2 结果与分析

2.1 SOD同工酶比较

从图1可以看出,7个白菜均含有SOD酶活性,其中A、B、C品种的SOD同工酶由1、2、3、4、5五条谱带组成;而D、E、F、G号品种少了第2条谱带,由1、3、4、5四条谱带组成。2.2 MDH同工酶比较

由图2可见,7个白菜均含相同数量和迁移率的MDH同工酶酶带,都是3条谱带。

2.3 POD同工酶比较

图3表明,A、B、G品种的POD同工酶酶带最多,由1、2、3、4、5五条谱带组成;而C品种的POD同工酶酶带最少,由1、2、4三条组成;D、E、F品种由1、2、3、4四条谱带组成。

2.4 EST同工酶比较

图4证明不同品种的EST同工酶酶带差异较大。B、G品种的EST同工酶酶带由1、2、3、4、5、6、7、8八条酶带组成;D、E、F由1、2、3、4、5、6、8七条酶带组成;而A品种由4、5、6、7、8五条酶带组成;C品种由3、8二条酶带组成。

3 讨论

SOD属于金属酶,在自然界分布极广,是一种重要的氧自由基清除剂。研究表明,SOD在防御氧的毒性和核辐射损伤、抗炎及抗肿瘤方面有独特的作用。该实验结果,7个白菜的SOD活力都较高,且SOD同工酶酶带也较多,有4~5条。也可以说明,多吃白菜有利于身体健康。不同品种白菜间SOD同工酶酶带的差异较小,而且SOD同工酶染色是负染色,不够稳定,不宜作为分类的主要依据。

MDH是三羧酸循环中重要的脱氢酶之一。它广泛存在于各种动、植物中。该研究表明,7个品种白菜都有三条相同的MDH同工酶酶带,品种间无差异。

POD和EST都是在植物中广泛而大量存在的酶。该研究表明,这两种同工酶在品种间有一定的差异,且酶带清晰、稳定,可考虑用这两种同工酶的电泳分析作为区分不同品种的依据。因为在种子萌发过程中,种子内物质发生变化,同一品种不同生长期及条件下,POD、EST同工酶都有差异,作为品种鉴定应规定种子萌发的时间和条件。这一点也很重要。

7个白菜中,B、G是金华当地品种,其它五个都是上海种。在五个上海品种中,D、E、F植株外观较近,并且都是迟抽苔,而A、C易抽苔。而从几种同工酶电泳比较分析看,7个品种白菜的D、E、F三者较接近,B与G较接近。这也验证了上述情况。